流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種對(duì)處在快速流動(dòng)中的細(xì)胞或其它生物微粒逐個(gè)進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。它集計(jì)算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、熒光標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體，按照細(xì)胞或生物顆粒的物理或化學(xué)性質(zhì)，同時(shí)具有分析和分選細(xì)胞或生物顆粒的功能。那么你知道流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、流式細(xì)胞術(shù)科研應(yīng)用

1.細(xì)胞凋亡檢測(cè)

在正常細(xì)胞中，細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）位于胞漿側(cè)。細(xì)胞凋亡中期，PS 外翻。Annexin V 是一種 Ca2+ 依賴的對(duì) PS 具有高度親和力的磷脂結(jié)合蛋白，因此可以用熒光標(biāo)記的 Annexin V 檢測(cè) PS 的外翻。凋亡末期，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受損，原本不透膜的核酸染料（如 PI、7-AAD 等）也能進(jìn)入細(xì)胞，從而產(chǎn)生信號(hào)。分別檢測(cè) Annexin V 和不透膜核酸染料的信號(hào)，可對(duì)凋亡中期和末期細(xì)胞的比例進(jìn)行定量。

2.細(xì)胞周期檢測(cè)

細(xì)胞核 DNA 含量隨著細(xì)胞增殖周期時(shí)相的不同而發(fā)生變化，用 DNA 染料進(jìn)行染色，DNA 含量多，熒光信號(hào)強(qiáng)，DNA 含量少，熒光強(qiáng)度低。通過(guò)對(duì)細(xì)胞瞬間的快速測(cè)定，判斷細(xì)胞所處的細(xì)胞周期時(shí)相，并分析群體細(xì)胞中處于不同周期時(shí)相的細(xì)胞比例，以研究細(xì)胞的周期，DNA 復(fù)制和染色體倍性等。在腫瘤學(xué)研究中尤其常用，可以此來(lái)判斷藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞影響、腫瘤的生長(zhǎng)速度與患者預(yù)后等。

3.Th/Treg檢測(cè)

通過(guò)刺激阻斷劑對(duì) T 細(xì)胞進(jìn)行處理，通過(guò)檢測(cè)表面或胞內(nèi)標(biāo)志物進(jìn)行分型檢測(cè)。

4.免疫分型檢測(cè)

利用細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)特異性抗體分子，分別選用不同標(biāo)記的流式抗體對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分型和分析。

利用抗原/抗體反應(yīng)原理，采用不同的流式抗體對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)可達(dá)到對(duì)不同細(xì)胞進(jìn)行分型檢測(cè)的目的。

5.細(xì)胞因子檢測(cè)

采用 CBA 或液相芯片的方法將捕獲抗體和微球/液相芯片結(jié)合，檢測(cè)抗體和 SA-PE 結(jié)合通過(guò)抗原抗體特異性反應(yīng)達(dá)到多種細(xì)胞因子檢測(cè)的目的。

二、流式細(xì)胞術(shù)生物產(chǎn)業(yè)應(yīng)用

流式細(xì)胞術(shù)生物產(chǎn)業(yè)應(yīng)用主要為生物醫(yī)藥和醫(yī)療器械公司醫(yī)藥和醫(yī)療器械研發(fā)使用。

流式細(xì)胞檢測(cè)離不開(kāi)流式細(xì)胞儀、流式抗體和檢測(cè)樣本 3 部分，而其中流式細(xì)胞儀則是最重要的，它是一種集激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)以及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的高科技儀器。主要由液流系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電子系統(tǒng)、數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)等組成。

自 1973 年第yi臺(tái)商用流式細(xì)胞儀問(wèn)世以來(lái)，經(jīng)過(guò)近 50 年的發(fā)展流式細(xì)胞儀在結(jié)構(gòu)上發(fā)生了一系列的演變：由簡(jiǎn)單到復(fù)雜、由單激光到多激光、由單色到多色、由分析到分選、從傳統(tǒng)流式到質(zhì)譜流式和光譜流式等。

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